Il-pjanċi tal-kultura taċ-ċelluli huma komunement użati u konsumabbli importanti fl-esperimenti tal-kultura taċ-ċelluli minħabba li jistgħu jiffrankaw il-ħin u materjali reaġenti għal esperimenti taċ-ċelluli, u jistgħu jistabbilixxu varjabbli dinamiċi multipli fl-istess ħin biex jiffaċilitaw l-osservazzjoni u l-iskoperta.
pjanċa tal-kultura
1. L-għotjien ta '96, 24-pjanċi tal-kultura sew jew dixxijiet petri huma maħlula ħafna, li huwa konvenjenti għall-ventilazzjoni, iżda se jiżolqu wkoll batterji, forom u sustanzi oħra li jniġġsu?
Tweġiba: (1) Il-qoxra hija maħlula ħafna u tappartjeni għal kultura semi-miftuħa. L-iskop ta 'dan huwa li tieħu n-nifs (fil-fatt, biex tippermetti li s-CO2 barra d-dixx tal-kultura jiġi skambjat bis-sħiħ mad-dixx tal-kultura biex jinżamm il-valur tal-pH tal-mezz).
(2) Hemm vantaġġi u żvantaġġi, li jżidu l-possibbiltà ta 'tniġġis. Barra minn hekk, dan jikkawża li l-likwidu fid-dixx petri jevapora, li huwa notevoli għal dożaġġ preċiż ta 'drogi. Għalhekk iż-żewġ miżuri li ġejjin huma meħtieġa:
a) L-arja fl-inkubatur għandha tkun nadifa (dawl ultravjola regolari, għorik bl-alkoħol, u l-inkubatur għandu jinxtegħel u jintefa mill-inqas possibbli)
b) L-umdità fl-inkubatur għandha tinżamm f'100 fil-mija f'kull ħin (sink li fih jitqiegħed ilma distillat sterili fl-inkubatur). Oqgħod attent għall-operazzjoni asettika!
2. Iċ-ċelloli tiegħi huma mlaqqma fuq il-pjanċa tal-kultura, u ċ-ċelloli dejjem jinġabru fil-parti periferali. X'irrid nagħmel? Nara li ċ-ċelloli ta’ xi sħabi fl-armi jinġabru fin-nofs. Hija problema bil-kwalità tal-pjanċa?
A: Kif tħallat iċ-ċelloli tiegħek? Huwa pipetta nfiħ jew tħawwad il-pjanċa tal-kultura? Jekk hija l-aħħar, u titħawwad f'ċirku, huwa probabbli ħafna li ċ-ċelloli jintefgħu fil-parti tal-madwar minħabba l-forza ċentrifugali, li tirriżulta fin-nofs taċ-ċelloli. Inqas, aktar minn erba’ ġimgħat! Tista' tipprovaha lilek innifsek!
Mod tajjeb: qabel ma tikkultiva l-pjanċa taż-żerriegħa, poġġi l-pjanċa tal-kultura fl-inkubatur għal ftit sigħat ta 'saturazzjoni u mbagħad oħroġha. Meta tinżera 'ċ-ċelloli, il-forza għandha tkun ħafifa. Tista 'tuża dripper fuq in-naħa tat-toqba tal-pjanċa tal-kultura Żid bil-mod biex tippermetti li s-sospensjoni taċ-ċelluli tiċċirkola fil-bjar tal-pjanċa, u ċ-ċelloli kkultivati jikbru sostanzjalment b'mod uniformi. Ftakar li qatt ma tħawwad l-oxxillatur jew iċ-ċelloli tiegħek jinġabru flimkien bħalma għidt.
3. Iċ-ċelluli tiegħi jgħaddu b'mod normali, iżda meta tip wieħed jidħol fi pjanċa b'sitt ħofor (irrispettivament miż-żieda u l-kontroll tad-droga), dejjem hemm żewġ jew tliet bjar (b'mod każwali) ċelluli li ma jikbrux sew, huma żgħar, u jidhru li jinkiser. Xi ħadd iltaqa' ma' dan? X'inhi r-raġuni?
A: Jista 'jkun relatat mat-temperatura tal-likwidu li żżid. Jekk iċ-ċelloli tiegħek għadhom kemm inħarġu biex ibiddlu l-medju u żid il-medju, u l-medju jinħareġ ukoll mill-friġġ ta '4 gradi dalwaqt, huwa faċli li ċ-ċelloli jiffriżaw għall-mewt. Huwa rakkomandat li l-ewwel tinkuba l-medium fl-inkubatur għal 15-il minuta.
Barra minn hekk, huwa wkoll relatat mal-istat tat-tkabbir taċ-ċelloli tiegħek. Iċ-ċelloli qabel id-dożaġġ jistgħu jiġu inkubati b'konċentrazzjonijiet għolja fis-serum. Kun żgur li ċ-ċelloli jkunu f'kundizzjoni tajba.
Jew tista 'tiġi inkubata f'banju ta' l-ilma ta' 37-grad, jew il-problema tal-pjanċa tal-kultura nnifisha, tista 'tipprova pjanċa tal-kultura oħra. Possibbiltà oħra hija l-problema ta 'l-istat taċ-ċellula, aġġusta l-konċentrazzjoni tas-serum meta tinżera' l-pjanċa.
4. F'dawn l-aħħar jiem, użajt pjanċa ta 'kultura ta' sitt birijiet biex inokula ċ-ċelloli. Wara l-kultura għal 24 siegħa, biddilt il-mezz. Qabel ma nbidilt il-medju, osservajt li ċ-ċelloli aderixxu mal-ħajt, u l-istat kien tajjeb ħafna. Wara li bdilt il-mezz, użajt il-mikroskopju immedjatament. Ġie osservat li kważi nofs iċ-ċelluli f'kull bir urew stat qrib il-mewt. Iċ-ċelloli jsiru żgħar ħafna u jipproduċu ħafna debris, filwaqt li n-nofs l-ieħor taċ-ċelloli huma normali, hemm qsim bejn ċelloli anormali u ċelloli normali, in-nofs ċirku ta 'fuq huwa tajjeb, in-nofs ċirku t'isfel mhuwiex tajjeb, kif inhu dan? X'ġara?
A: Tista 'tara jekk hemmx xi waħda mir-raġunijiet li ġejjin
a. Il-pjanċa tal-kultura mhix imqiegħda orizzontalment;
b. Kif dwar il-mezz tal-kultura tiegħek, jekk il-mezz tal-kultura jiskadi, iċ-ċelloli mhux se jaderixxu. Ipprova mezz ippreparat frisk
c. Jista 'jkun il-problema tal-pjanċa. Mhix problema li tibdel il-pjanċa ta 'marka oħra jew tuża l-flixkun tal-kultura.
d. Oqgħod attent għall-influwenza tal-fann meta tbiddel il-medju, speċjalment meta jkun hemm ħafna pjanċi tal-kultura li jeħtieġ li jiġu sostitwiti, huwa faċli li tikkawża li ċ-ċelloli jiċkienu u jinkisru minħabba telf ta 'riħ u ilma. Jekk iva, il-medju għandu jinbidel wieħed wieħed, u tibżax li taħli l-pipetta, oqgħod attent għall-effiċjenza tal-operazzjoni!
5. Għaddew erbat ijiem minn meta ċ-ċelloli ġew diġeriti u mlaqqma fi 24-platt tal-bir, u l-parti tan-nofs ta’ kull bir kienet dejjem mimlija. Il-medium inħasel bil-PBS kuljum, u l-istess sitwazzjoni seħħet meta l-medium inbidel l-għada. It-truf huma twal sew u ċ-ċentru huwa mimli ċelluli mejta?
Tweġiba: Jekk iċ-ċelloli huma densi madwar u skarsi fin-nofs, hemm bejn wieħed u ieħor ir-raġunijiet li ġejjin:
Il-medju ġie miżjud ftit wisq. Prinċipalment minħabba l-problema tat-tensjoni tal-likwidu.
Jekk hemmx inqas ilma fil-qiegħ tal-inkubatur;
It-tħawwid wara ż-żerriegħa taċ-ċelluli kien wisq. Iċ-ċelloli huma mqassma madwar minħabba forza ċentrifugali.
Iċ-ċavetta biex iċ-ċelluli humiex imqassma b'mod ugwali hija li kull tip ta 'ċellula għandha differenzi individwali, u l-operazzjonijiet taċ-ċelluli ta' nies oħra jistgħu ma jkunux adattati għalik. Allura trid tesplora waħdek u ssib sett ta 'regoli li huma uniċi għaċ-ċelloli tiegħek. Għandek l-esperjenza li ġejja:
(1) Is-sospensjonijiet kollha taċ-ċelluli li għandhom jinżergħu għandhom jitħalltu b'pipetta qabel iż-żrigħ.
(2) Skont ir-rekords, il-volum likwidu tal-pjanċa tal-{1}}bir huwa 1ml, fil-fatt, il-volum ta '1ml huwa biżżejjed.
(3) Meta tlaqqam, żid il-kampjun bil-mod, u ftakar li ddawwar it-tarf tal-pipetta ftit. Il-kampjun ma jistax jiġi miżjud malajr wisq biex jiġi evitat li ċ-ċelloli jakkumulaw f'punt wieħed ta 'żieda tal-kampjun, u agħti attenzjoni biex iżżid kampjuni f'partijiet differenti, jiġifieri, filwaqt li żżid il-pistola mobbli. Kap, artifiċjalment jagħmlu l-ċelluli għandhom tendenza li jkunu mqassma b'mod uniformi. Jekk tagħmel hekk għandha l-effett li tqassam indaqs iċ-ċelloli.
